Определение осмотического давления клеточного сока методом плазмолиза

Материалы и оборудование: листья традесканции или другого растения с окрашенным клеточным соком, стакан с кипяченой водой, бритва, растворы сахарозы или хлористого натрия 0,5М, 0,4М, 0,ЗМ, 0,2М 0,1М, стекла предметные или покровные, стаканчики или тигельки, фильтровальная бумага, микроскоп.

Для нормальной жизни клеток необходимо, чтобы концентрация клеточного сока, а, следовательно, и его осмотическое давление были несколько выше, чем окружающего раствора. При определении осмотического давления пользуются методом плазмолиза. Известно, что при погружении растительной ткани в раствор соли, концентрация которого выше (гипертонический), чем концентрация клеточного сока, будет наблюдаться явление, плазмолиза — отставание цитоплазмы от клеточных стенок. В изотоническом и гипотоническом растворах плазмолиза не будет. Наблюдая степень плазмолиза на срезах ткани, можно подобрать раствор, изотонический (равный) клеточному соку. Его концентрация будет промежуточной между той, которая вызывает начальный (уголковый) плазмолиз не менее чем у 50% клеток в поле зрения микроскопа, и той, которая не вызывает плазмолиза. Зная концентрацию раствора клеточного сока можно вычислить его осмотическое давление.

Определение осмотического давления клеточного сока
Определение осмотического давления клеточного сока

Осмотическое давление (Р) разбавленных растворов подчиняется газовым законам и зависит от температуры, их молярной концентрации и относительного числа частиц (У).

Р = R× С× Т× У,    где

R — универсальная газовая постоянная, равная 0,0821 атм/град×моль;

С — концентрация раствора в молях;

Т — абсолютная температура (273°+ t°);

У — изотонический коэффициент.

Последний для неэлектролитов равен 1, а у электролитов зависит от числа частиц, на которые диссоциируют молекулы и от степени диссоциации. Для NaCl он примерно равен 1,5.

Ход работы

Приготовить десять микроскопических срезов из ткани с окрашенным клеточным соком, по мере приготовления срезов их сразу же погрузить в кипяченую воду для того, чтобы в них было меньше пузырьков воздуха.

В тигельки налить одинаковое количество раствора, предварительно подписав на них концентрацию и поставить их по убывающей концентрации. Взять два среза сразу же погрузить их в раствор 0,5М. Через пять минут пару срезов погрузить в раствор 0,4М. Таким образом, во все растворы через каждые пять минут будут внесены по два среза.

Когда последние срезы будут опущены в раствор 0,1М, необходимо подготовить все для работы с микроскопом. По истечении пяти минут вытащить оба среза из раствора 0,5М, поместить их на предметное стекло в каплю этого же раствора и рассмотреть внимательно под микроскопом в течение пяти минут, затем достать срезы из раствора 0,4М и рассмотреть. Таким образом, в каждом растворе срезы пролежат до 25 минут. Результаты наблюдения занести в таблицу 1.

Таблица 1

Концентрация раствора Степень плазмолиза Рисунок
0,5М    
0,4М    
0,ЗМ    
0,2М    
0,1M    

По результатам наблюдения найти изотоническую концентрацию и рассчитать осмотическое давление клеточного сока по вышеприведенной формуле.

Осмотическое давление можно определить и другим способом, пользуясь законом Осмоса, а именно: «грамм-молекулярные растворы всех веществ имеют одинаковое осмотическое давление, равное при 0° — 22,4 атм для неэлектролитов и 33,6 атм — для электролитов”.

1 моль  — 33,6 атм.

Изотоническая концентрация — Х

Х =33,6 ×  изотоническая концентрация    = А атм.

Если сравнить данные, полученные двумя указанными способами, то получим разницу, выражающуюся долями атмосферы. Объясняется это тем, что в первом способе давление рассчитывается при комнатной температуре.

Ссылка на основную публикацию
Adblock detector